Питательная среда

Необходимыми условиями для точной оценки морфологии клеток при цитологическом и иммуноцитохимическом исследованиях являются высокое качество и адекватность мазка. Качество цитологической диагностики зависит от многих причин: получения материала, фиксации и окрашивания, методики просмотра материала, опыта цитолога и правильности интерпретации, правильной формулировки диагноза, использования дополнительных, современных методов исследования.

Попытки избежать подобных ошибок привели к разработке целого арсенала новых жидкостных технологий (Prep Stein, Cytospin, Novo prep и т.д.), нацеленных на улучшение качества и адекватности цитопрепаратов. Однако все жидкостные технологии предлагают транспортные среды для биоматериала, обязательно содержащие в своем составе алкоголь. Проведение исследований на системе Cytospin, уже после первых опытов показало невозможность использования предложенной фирмой  «Shandon» среды накопления, использование которой вызывало полную деформацию, как ядра, так и цитоплазмы  клеток опухоли, что  затрудняло рутинный цитологический анализ полученного материала, не говоря уже об оценке иммунных реакций.

Данный «эффект агрессии» связан с химическими свойствами предложенной среды, состоящей из Denatured ethanol 10% et Polyethylene glycol 5%, рассчитанной на стабилизацию и фиксацию патологически неизмененных клеток плоского  и цилиндрического эпителия гинекологических мазков. В случае же с морфологически измененными опухолевыми клетками с признаками атипии и дистрофии, данный состав среды не приемлем ни для цитологического, ни для иммуноцитохимического  исследований.

Это послужило причиной поиска новой среды накопления, ликвидирующей этот недостаток. В нашем отделении разработан и запатентован новый состав среды накопления (заявка №2003113164\15 от 05.05.03, патент на изобретение № 2246110 «Питательная среда накопления образца клеток для последующего цитологического и\или иммуноцитохимического анализа», решение о выдаче от 19.05.04). Все цитоспиновые препараты, используемые в цитологических и ИЦХ исследованиях, приготовлены с использованием данной питательной среды накопления.

Разработанный состав питательной среды обладает рядом достоинств:
Клетки полностью сохраняют свои морфологические, биохимические и биологические свойства, не изменяя иммунной специфичности, что очень важно для проведения иммунологических исследований.
Возможность сохранения и транспортировки клеток в данной среде в течение 1 – 2 суток.
Возможность длительного хранения при температуре 4°С.  
Полученная нами питательная среда накопления может быть рекомендована для использования в жидкостной системе приготовления высококачественных цитоспиновых препаратов, с целью последующего проведения цитологических и иммуноцитохимических исследований.

 

Биоматериал после пункции помещают в пробирку, содержащую среду ТПС-1, инкубируют при комнатной температуре в течение 10 минут, а затем центрифугируют. Осажденные клетки переносят в ячейки рабочей зоны биочипа.

№ дня исслед.\

t°C ислед.

Цитограмма серозного рака яичников. (Х200). Иммуноцитохимия, экспрессия СК7. (Х200).

1 день/+23°C

Рак яичника.
Пунктат свода влагалища.

1img.

1day-1 1day-2

3 день/+23°C

1img

2day-1 2day-2

5 день/+23°C

1img

3day-1 3day-2
7 день/+23°C

1img

4day-1 4day-2